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RNase-Substrat
 

Produktbeschreibung

RNase-Substrat

 

6-Fam-dArUdAdA-BHQ1 und das Analogon 6-Fam-dArUdAdA-BMN-Q530 dienen als Substrate zum einfachen Nachweis von RNasen. In intaktem Zustand ist die Fluoreszenz des Fluoresceins durch den Quencher gelöscht. Nach RNase-Spaltung des Substrats sind Fluorophor und Quencher getrennt und die Fluoreszenz des 6-Fam-Reporters kann bei 520 nm detektiert werden.

Schaubild der steigenden Fluoreszenz nach Spaltung des Substrats Fluoreszenzspektrum des gespaltenen Substrats

Fluoreszenz-Zunahme durch Spaltung von 6-Fam-dArUdAdA-BHQ1 (200 pM RNase A, 100 nM RNase Substrat, 100 mM MES-Puffer, pH = 6.0, 100 mM NaCl), Detektion bei 515 nm, Anregung bei 490 nm.

 

Fluoreszenzspektrum des gespaltenen 6-Fam-dArUdAdA-BHQ1

Fluoreszenzfreisetzung nach RNase Substratspaltung
 
 


Literatur:
1. Hypersensitive substrate for ribonucleases. Kelemen BR, Klink TA, Behlke MA, Eubanks SR, Leland PA, Raines RT; Nuc. Acids Chem. (1999), 27, 3696-3701.

2. A Ribonuclease Variant with Low Catalytic Activity but High Cytotoxicity. Bretscher LE, Abel RL, Raines RT.  J. Biol. Chem. (2000), 275.